重点实验室
重点实验室
辽宁省实验动物模型重点实验室是辽宁省科技厅2013年设置的省重点实验室,经过多年的建设,已建成集模式生物研发、生产和动物实验服务三位一体的综合性服务平台。提供常规转基因、常规基因敲除、条件型基因敲除和基于CAS9技术的基因编辑小鼠、仓鼠等临床模式动物制备服务以及动物代繁代养服务等。
基因修饰动物模型
1、转基因制作
转基因是将外源DNA通过显微注射的方法注射到小鼠受精卵的原核内,注射DNA整合到受精卵的基因组中,并遗传给后代。
2、基因敲除(KO)
用大小鼠基因特异sgRNA(single-guide RNA)介导Cas9核酸酶切割DNA出现特定的DSBs( double-stranded breaks),通过NHEJ(nonhomologous end joining)修复途径造成靶基因的Indel ( insertion/deletion),产生移码突变(frameshift mutations)、翻译提前终止(premature stop codon)或者片段删除,从而实现基因敲除。成功率高达100%,且不受品系限制,可以实现多基因同时敲除。
3. 基因敲入(KI)
(1) 特定位点寡核苷酸突变
在小鼠基因组中的特定位点敲入突变,包括单个或多个碱基突变、单个或多个氨基酸突变等。
(2) 特定位点基因敲入
在小鼠基因组中的特定位点敲入异源基因,如:荧光蛋白,LacZ,Luciferase,CreERT2,LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP等。
4. 条件性基因敲除(CKO)
条件性基因敲除是通过Cre-LoxP/FLP-Frt重组系统来实现的。在目的基因两端各放置一个LoxP序列,得到Floxed小鼠。将Floxed小鼠与Cre小鼠交配,即可获得目的小鼠。
5. 诱导性点突变制作
利用Cre重组酶介导的删除和倒位,可以实现目的基因的诱导性点突变。
动物模型
小鼠品系模型 | 地鼠品系模型 | 人源肿瘤异种移植模型 |
TP53小鼠模型 | AS160地鼠模型 | 胃癌移植瘤NYG小 鼠模型 |
APOE小鼠模型 | PRKDC D140地鼠模型 | 肺癌移植瘤NYG小鼠模型 |
LDLR小鼠模型 | NOS3地鼠模型 | 肝癌移植瘤NYG小鼠模型 |
NEO小鼠模型 | PCSK9 D22地鼠模型 | 食道癌移植瘤NYG小鼠模型 |
AS160小鼠模型 | PCSK9 D380Y地鼠模行 | 胰腺癌移植瘤NYG小鼠模型 |
ACE2小鼠模型 | MIR223地鼠模型 | 结直肠癌移植瘤NYG小鼠模型 |
NYG D10-D50小鼠模型 | Leptin地鼠模型 | |
APP/PS1小鼠模型 | LDLR APOE和LDLRMUT717地鼠模型 | |
NOD SCID与NYG以及NYG D10-D50与NYG小鼠模型 |
模型制备
药物诱导模型 | 手术诱导模型 | 转基因模型 |
肺纤维化模型(气管给药) | 脑缺血再灌注模型(颈动脉结扎法) | 基因工程小鼠制备(显微注射) |
慢性心衰模型(注射给药) | 大脑中动脉栓塞和缺血再灌注模型(线拴法) | 模型小鼠保种(活体/胚胎冷冻) |
帕金森/癫痫模型(脑立体定位法) | 心肌梗死模型(开胸法) | 模型小鼠代养与扩繁(体外受精扩繁) |
哮喘模型(雾化法) | 坐骨神经钳夹和离断模型 | |
肿瘤皮下成瘤模型(皮下注射法) | 脊髓损伤模型(打击器法) | |
肿瘤PDX模型(组织块移植) | 肾缺血再灌注模型(肾动脉结扎法) | |
溃疡性结肠炎模型 | 骨质疏松模型(卵巢摘除法) | |
妊娠糖尿病模型 | 肝纤维化/肝硬化模型(胆总管结扎法) | |
类风湿关节炎动物模型 | 脓毒血症模型(盲肠结扎穿刺法) | |
糖尿病肾病模型 | 血管内皮损伤模型(球囊/导丝法) |
干细胞及免疫细胞
间充质干细胞分离、鉴定、培养、分化及各种疾病研究
免疫细胞分离、诱导培养、鉴定及各种疾病研究
细胞功能学
细胞活性检测、细胞增殖检测、细胞凋亡检测、细胞周期检测、细胞自噬检测、细胞坏死检测、细胞焦亡检测、细胞铁死亡检测、细胞迁移能力检测、细胞划痕检测、细胞黏附能力检测、细胞侵袭能力检测、细胞免疫化学染色、细胞免疫荧光染色、细胞RNAscope实验、细胞线粒体自噬检测、细胞内质网应激检测、细胞荧光原位杂交(FISH)实验。
分子生物学
DNA提取、DNA甲基化、基因多态性检测、转录因子功能及调控
RNA提取、RNA甲基化、lncRNA表达及调控、circRNA表达及调控、miRNA加尾法PCR、miRNA茎环法PCR
载体构建、病毒制备、双荧光素酶实验、EMSA实验、RNA pull-down、RNA免疫共沉淀(RIP)、染色质免疫共沉淀(CHIP)
蛋白提取、蛋白修饰检测、蛋白活性分析、免疫共沉淀
Western 杂交、Southern 杂交、Northern 杂交、定量RT-PCR检测
病理形态
普通病理:脱钙与软化、标本包埋、切片、HE染色、特殊染色
分子病理:免疫组化、免疫荧光、TUNEL、原位杂交
病理图像:切片扫描、共聚焦、拍照分析、三维重建、AI病理分析
超微病理:透射电镜、扫描电镜能谱、电镜分析、免疫电镜
多组学研究
高通量测序
蛋白质组
代谢组
磁纳米粒子及精密磁检测技术
磁粒子成像
免洗型磁标记免疫分析
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